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细胞克隆形成实验


一、实验介绍细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依
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一、实验介绍

细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。

二、实验目的

1)通过对细胞处理后在细胞培养板上的克隆形成能力来提示处理后细胞的群体依耐性及增殖能力

2)评价不同杀伤因素(药物、基因等)对肿瘤细胞增殖能力或群体依赖性的敏感性;

3)评价细胞在体内成瘤性,癌细胞不一定都可以在体内成瘤,但若体外克隆能力越强,即表明体内成瘤性越强,算是一种模拟体内成瘤的体外实验。


三、实验结果展示

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四、送样运输要求:

 1 冻存细胞

冻存管寄送前,使用封口膜把冻存管口封严密,冻存管单独用自封袋存放。干冰运输。运输时间在2天以内干冰用量在10kg,在2-4天,干冰用量在20kg

2 活细胞

(1) 使用T25瓶,瓶盖无孔。

(2) 生长状态良好的细胞,细胞密度在30%-40%为宜,寄送前,移去瓶内旧培养基,添加新培养基至瓶颈部,保留微量空气,拧紧瓶盖,并用封口膜密封,瓶身用75%表面消毒,把瓶用无菌袋或自封袋包装,然后放置在适当的盒内,盒周围用棉花等做防震防压处理。当温度低于10度是要加保温措施,如暖宝宝等。

(3) 细胞培养条件备注完整,如培养基,培养温度,FBS用量等。

(4) 备注:运送时间原则在4天以内,如细胞生长速度快,则加入的培养基血清可以减半,细胞密度在20%-30%

 

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