流式ROS检测实验

一、实验介绍

活性氧（reactive oxygen species，ROS）指来源于氧的自由基和非自由基，包含了超氧阴离子（O2•-）、过氧化氢（H2O2）、羟基自由基（•OH）、臭氧（O3）和单线态氧（1O2）等，由于它们含有不成对的电子，因而具有很高的化学反应活性。

DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有绿色荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。

二氢乙啶(Dihydroethidium, DHE)，可自由透过活细胞膜进入细胞内，并被细胞内的ROS氧化，形成氧化乙啶。氧化乙啶可掺入染色体DNA中，产生红色荧光。根据活细胞中红色荧光的产生，可以判断细胞ROS含量的多少和变化。二氢乙啶在细胞内主要被超氧阴离子型ROS氧化，用流式细胞仪或荧光显微镜可直接观察。

二、实验目的

检测细胞内活性氧水平。

三、实验结果展示

四、送样运输要求：

活细胞样本常温运输;

新鲜组织样本需要浸泡在生理盐水中4℃运输;

客户提供组织、细胞信息，不接收冻存样本。