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MTT检测实验
一、实验介绍
MTT法又称MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶联免疫检测仪在568m波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。
二、实验目的
1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定;
2.细胞增殖及细胞活性测定。
三、实验结果展示
四、送样运输要求:
1 冻存细胞
冻存管寄送前,使用封口膜把冻存管口封严密,冻存管单独用自封袋存放。干冰运输。运输时间在2天以内干冰用量在10kg,在2-4天,干冰用量在20kg。
2 活细胞
(1) 使用T25瓶,瓶盖无孔。
(2) 生长状态良好的细胞,细胞密度在30%-40%为宜,寄送前,移去瓶内旧培养基,添加新培养基至瓶颈部,保留微量空气,拧紧瓶盖,并用封口膜密封,瓶身用75%表面消毒,把瓶用无菌袋或自封袋包装,然后放置在适当的盒内,盒周围用棉花等做防震防压处理。当温度低于10度是要加保温措施,如暖宝宝等。
(3) 细胞培养条件备注完整,如培养基,培养温度,FBS用量等。
(4) 备注:运送时间原则在4天以内,如细胞生长速度快,则加入的培养基血清可以减半,细胞密度在20%-30%。