CCK8检测实验

CCK8检测实验

一、实验介绍

Cell Counting Kit-8（简称CCK-8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。

二、实验目的

1．药物（也包括其他处理方式如放射线照射）对体外培养的细胞毒性的测定；

2．细胞增殖及细胞活性测定。

三、实验步骤

四、实验结果展示

五、送样运输要求：

1 冻存细胞

冻存管寄送前，使用封口膜把冻存管口封严密，冻存管单独用自封袋存放。干冰运输。运输时间在2天以内干冰用量在10kg，在2-4天，干冰用量在20kg。

2 活细胞

(1) 使用T25瓶，瓶盖无孔。

(2) 生长状态良好的细胞，细胞密度在30%-40%为宜，寄送前，移去瓶内旧培养基，添加新培养基至瓶颈部，保留微量空气，拧紧瓶盖，并用封口膜密封，瓶身用75%表面消毒，把瓶用无菌袋或自封袋包装，然后放置在适当的盒内，盒周围用棉花等做防震防压处理。当温度低于10度是要加保温措施，如暖宝宝等。

(3) 细胞培养条件备注完整，如培养基，培养温度，FBS用量等。

(4) 备注：运送时间原则在4天以内，如细胞生长速度快，则加入的培养基血清可以减半，细胞密度在20%-30%。