原位末端凋亡（TUNEL)实验

一、实验介绍

TUNEL技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色，能准确反映细胞凋亡最典型的生物化学和形态特征。

   凋亡细胞内内源性核酸内切酶被激活而将自身染色体DNA切断成缺口或3-OH末端片段这一特点,利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如地高辛,生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-OH末端,再用免疫组化法或免疫荧光检测凋亡细胞。

二、特点及适用范围

组织学、胚胎学、生物学、病理学教学与科研。

三、TUNEL细胞凋亡检测实验步骤

（荧光）组织脱水-组织透明-浸蜡-包埋-切片和烤片-切片脱蜡-蛋白酶K修复-破膜通透-孵育tunel反应液-DAPI染核-抗荧光素淬灭剂封片-镜检拍照

（白光）组织脱水-组织透明-浸蜡-包埋-切片和烤片-切片脱蜡-蛋白酶K修复--破膜通透-孵育tunel反应液-孵育Streptavidin-HRP反应液-DAB显色-苏木素染核-脱水封片-镜检拍照

四、实验结果展示

五、送样运输要求：

　　样本放置于5倍样本体积的4%多聚甲醛固定液中固定24h以上，常温运输送样。切勿固定时间过长，切勿冷冻结冰。